磁珠法提取試劑盒在實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用主要涉及核酸提取和外泌體提取等場景,以下是其具體應(yīng)用方法:
一、核酸提取
磁珠法核酸提取試劑盒廣泛應(yīng)用于從各種生物樣本中提取高純度的核酸(DNA或RNA),適用于多種樣本類型,如動(dòng)物組織、血液、唾液、尿液、骨骼、牙齒等。
1. 手動(dòng)操作流程
以提取微量樣本DNA為例,操作步驟如下:
裂解樣本:將樣本(如血液、組織等)加入裂解液(如Buffer SL)和蛋白酶K,渦旋混勻后在56°C孵育,使樣本裂解。
加入磁珠:加入異丙醇和磁珠,渦旋混勻后在25°C震蕩結(jié)合,使核酸與磁珠結(jié)合。
洗滌:將離心管置于磁力架上靜置,棄去上清液后,加入洗滌液(如Buffer GW1和GW2),重復(fù)洗滌步驟以去除雜質(zhì)。
洗脫:最后加入洗脫液(如RNase-Free Water),在56°C震蕩洗脫,得到高純度的核酸。
2. 與自動(dòng)化提取儀匹配
對(duì)于高通量需求,可與自動(dòng)化提取儀(如CWE2100)配合使用。將樣本和試劑按程序要求加入深孔板中,運(yùn)行特定程序,儀器自動(dòng)完成核酸提取過程。

二、外泌體提取
磁珠法提取試劑盒還可用于外泌體的提取,例如從血漿樣本中提取外泌體:
預(yù)處理:先通過低速離心去除血漿中的細(xì)胞及細(xì)胞碎片,再用0.22μm濾膜過濾去除大的細(xì)胞外囊泡。
磁珠結(jié)合:將過濾后的血漿樣本與磁珠混合,孵育一段時(shí)間,使外泌體與磁珠結(jié)合。
分離與收集:通過磁力架分離磁珠,收集含有外泌體的上清液。
三、應(yīng)用優(yōu)勢(shì)
高效快速:操作簡便,提取時(shí)間短,適合高通量樣本處理。
純度高:提取的核酸純度高,可直接用于下游實(shí)驗(yàn),如PCR、測(cè)序等。
自動(dòng)化兼容:可與多種自動(dòng)化提取設(shè)備配合使用,提高實(shí)驗(yàn)效率。
磁珠法提取試劑盒憑借其高效、便捷和高純度的特點(diǎn),在實(shí)驗(yàn)室中廣泛應(yīng)用于核酸提取和外泌體提取等場景,能夠滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。
以上知識(shí)僅供參考,希望對(duì)你有所幫助!